TÉCNICA: MAY GRÜNWALD – GIEMSA
REAGENTES
Corante - May Grünwald - conservar entre 15 e 30 oC. Contém:
Eosina e azul de metileno 180 mg/dL.
Corante - Giemsa - conservar entre 15 e 30 oC. Contém:
Azur II 80 mg/dL e eosinato de Azur II 100 mg/dL.
EQUIPAMENTOS E INSUMOS OPERACIONAIS
Suporte para coloração, relógio ou cronômetro, pipetas, lâminas.
Encontram-se no mercado especializado de artigos
para Laboratórios de Análises Clínicas.
CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE
A temperatura de armazenamento e transporte deverá ser de 15 a 30 °C. Manter ao abrigo da luz e evitar umidade.
Coleção das AMOSTRAS
Epitélio escamoso (estratificado) oral, aquisição pode ser feita com o uso de um coletor simples (colheres descartáveis)
- Colhe-se a amostra raspando levemente o coletor pela mucosa da cavidade oral (epitélio)
- A colocação da amostra na lamina deve ser feita em um único sentido para não danificar as células recolhidas
AMOSTRAS DE SANGUE
Sangue periférico colhido por punção digital ou coleta venosa,
de preferência sem anticoagulante ou com uso de EDTA
· Pode-se utilizar um dispositivo perfurante limitado como uma mini lanceta
·
· A digital à ser perfurada deve ser limpa com o uso de um álcool de concentração apropiada
·
· A assepsia de ser feita em um único sentido para evitar a movimentação de bactérias periféricas de um lado para o outro
·
· De preferências entre o segundo a quinto quirodáctilos para realizar a coleção da amostra
Após o uso a objeto perfurante deve ser descartado em local especifico para o mesmo (lixeira de material contaminante )
O descarte do material utilizado deverá ser feito obedecendo-
se os critérios de biossegurança, de acordo com
a legislação vigente
As lâminas para confecção dos esfregaços devem estar
limpas e isentas de gordura
A gota de sangue utilizada para a confecção do esfregaço não deve ser muito grande, pois quanto maior a gota mais espesso o esfregaço
TÉCNICA
Colocar a lâmina no suporte de coloração.
Recobrir o esfregaço com 20 gotas do corante May-Grünwald.
Deixar atuar por três minutos.
Decorrido este tempo, acrescentar 20 gotas de água de torneira.
Misturar a solução nos diversos pontos da lâmina.
Evitar o extravasamento do corante.
Esperar dois minutos.
Figura 1:colocação do corante May-Grünwald
Figura 2: colocação das gotas de água (solução tampão )
Desprezar a mistura que recobre a lâmina e, sem lavar,
cobri-la com 20 gotas da solução diluída de Giemsa,
preparada no momento da coloração (uma gota de Giemsa
para cada mililitro de água destilada - em média utilizase
3 ml para cada lâmina). Esperar de 12 a 15 minutos.
Desprezar o corante, lavar a lâmina em água corrente.
Deixar secar em posição vertical
A lamina deve ser colocada de lado na água para não afetar a amostra
Secagem em posição vertical das laminas
RESULTADOS
Hemácias: coloração rósea;
Plaquetas: coloração azulada;
Neutrófilos: núcleo azul escuro e citoplasma rosa pálido
com granulações que variam do rosa ao azul claro;
Linfócitos: núcleo azul violeta e o citoplasma azul;
Basófilos: núcleo púrpura a azul escuro e citoplasma com
granulações volumosas azul escuro;
Monócitos: núcleo azul violeta e citoplasma azul claro;
Eosinófilos: núcleo azul e citoplasma rosa pálido com grânulos
volumosos que variam do vermelho ao laranja.
LIMITAÇÕES DO PROCESSO
Os esfregaços que apresentarem coloração azul ou
esverdeada estão alcalinos, devido ao tempo prolongado de
ação do corante, esfregaços grossos ou lavagem insuficiente
da lâmina.
Os esfregaços que apresentarem coloração vermelha estão
excessivamente ácidos devido a coloração insuficiente,
tempo de lavagem excessivo ou acidez do corante.
Os precipitados podem aparecer quando as lâminas estão mal lavadas, com poeira ou quando ocorre secagem do
corante durante o processo de coloração
Tenho prova pratica de um concurso e essa post vai me ajudar muito!!!
ResponderExcluir